Por: Dr. Jorge Luiz Mello Sampaio?Diagnóstico das diarreias causadas por Clostridium difficile
As diarreias relacionadas aos cuidados com a saúde, particularmente aquelas secundárias ao uso de antimicrobianos que alteram a microbiota intestinal, são frequentemente causadas porClostridium difficile, um bacilo gram-positivo esporulado e anaeróbio, cujos principais fatores de virulência são as toxinas A e B. As apresentações clínicas têm gravidade variável, desde diarreia até perfuração de cólon secundária a colite pseudomembranosa. Vários relatos descrevem a maior incidência de diarreia causada por esse agente nos últimos anos, com aumento da duração das internações hospitalares, maiores morbidade e mortalidade e elevação de custos (1-6). Um dos fatores relacionados com a crescente mortalidade é a maior incidência da cepa C. difficile NAP1 – sigla de North America Pulsed field type 1 –, que é hiperprodutora de toxinas A e B.
O bacilo C. difficile representa uma pequena fração da microbiota entérica da maioria dos indivíduos normais, mas o emprego de antimicrobianos que eliminam ou reduzem drasticamente a microbiota anaeróbia intestinal permite sua proliferação sem competição. Alguns antimicrobianos têm efeito mais pronunciado na redução da microbiota anaeróbia entérica e seu uso configura maior risco para a ocorrência de diarreia por C. difficile: clindamicina, quinolonas fluoradas, cefalosporinas e piperacilina-tazobactam. Não só os antimicrobianos estão implicados no aumento do risco de doença causada por C. difficile, pois pacientes em uso de inibidores de bomba de prótons e aqueles submetidos a quimioterapia apresentam maior risco do que a população geral (7). A diarreia por C. difficile (DCD) pode ocorrer em pacientes ambulatoriais e mesmo naqueles sem os fatores de risco clássicos. Alguns relatos na literatura apontam um aumento de casos na comunidade, em particular as gestantes como um grupo de risco (8).
Dentre os fatores que podem limitar a ocorrência de casos de DCD, os mais relevantes são a maior racionalização no uso de antimicrobianos e no ambiente hospitalar e a implementação de medidas de precaução de contato precocemente, de modo a impedir a ocorrência de transmissão cruzada. Para que estas sejam implementadas precocemente, a confirmação diagnóstica rápida, e com elevados valores preditivos negativo e positivo, é fundamental.
O método considerado o padrão-ouro para o diagnóstico é a cultura toxigênica, que consiste no isolamento da bactéria em meio seletivo anaeróbio, seguido de teste para avaliação da produção de toxinas A e/ou B. Em função do tempo necessário para liberação do resultado – de três a cinco dias – , o teste é pouco utilizado na prática clínica. O método com maiores sensibilidade e especificidade, comparado com a cultura toxigênica, é a detecção dos genes que codificam toxinas A ou B, por PCR em tempo real, a exemplo do sistema GeneXpert. Para esse teste, o estudo multicêntrico mais recente, envolvendo 2.296 pacientes, evidenciou sensibilidade de 93,5%, especificidade de 94,0%, valor preditivo positivo de 73,0%, valor preditivo negativo de 98,8% e prevalência de 14,7% (9). Os testes de detecção de toxinas ou glutamato desidrogenase têm sensibilidades inferiores e especificidades semelhantes às da PCR em tempo real. O valor preditivo negativo da PCR em tempo real é superior ao dos demais testes, enquanto o valor preditivo positivo é superior ou similar ao dos métodos fundamentados em detecção de antígenos. Várias outras publicações evidenciam que a PCR em tempo real é o exame com maiores sensibilidade e especificidade quando comparado à cultura toxigênica (10-14).
A Biologia Molecular começa a cumprir sua promessa de rapidez no diagnóstico com o sistema GeneXpert para a pesquisa do DNA de C. difficile em amostras fecais. O equipamento é capaz de extrair ácido nucleico da amostra clínica, amplificar e detectar a presença dos genes que codificam toxinas, tudo de forma integrada e automática. Os resultados são obtidos em uma hora após o recebimento da amostra na unidade hospitalar.
Considerando a sensibilidade e a especificidade superiores àquelas dos demais testes de detecção de toxinas, a melhor estratégia diagnóstica atualmente disponível é a PCR em tempo real com o sistema GeneXpert. Em face de um resultado negativo, e persistência da suspeita clínica, o exame indicado para complementação diagnóstica é a cultura específica para C. difficile.
Fonte: http://www.fleury.com.br/
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